![]() |
Даты проведения с 2023-01-19 по 2023-10-19 |
Сологов Сергей, ученик 11Б класса медицинского профиля. Государственное бюджетное общеобразовательное учреждение города Москвы «Школа № 1454». Руководитель проекта: Королева Светлана Игоревна – Учитель биологии и химии. Консультант проекта: Поликарпов Евгений Валерьевич – ассистент кафедры фармакологии Института Фармации им. А.П. Нелюбина Сеченовского Университета.
Актуальность: В 2020 году Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) сообщила, что более 5% населения мира страдает нарушениями слуха, что примерно составляет 466 миллионов человек. Одной из важных проблем на сегодняшний день является отсутствие эффективных стратегий восстановления слуха. Существующие решения – слуховые аппараты, кохлеарная имплантация – являются единственными средствами для снижения ограничения в быту пациентов, имеющих нарушения слуха. Однако, данные устройства не достигают качества «природного» слуха, что негативно отражается на качестве жизни таких пациентов. Данная работа посвящена изучению экспериментальной модели сенсоневральной тугоухости с целью последующего применения полученных знаний для создания более продвинутых способов лечения недуга.
Цель: Изучить возможность применения комбинации фуросемида (400 мг/кг) и гентамицина (200 мг/кг) на мышах как пригодной модели сенсоневральной тугоухости для последующего исследования фармакологически активных соединений как потенциальных отопротекторов и восстановления слуха генно-инженерными методами.
Задачи: 1. Изучить современную научную литературу по данной тематике 2. Изучить анатомию и гистологию внутреннего уха 3. Проанализировать образцы гистологических поперечных срезов булл в группе животных, подвергшихся воздействию изучаемой комбинации гентамицин + фуросемид и в интактной группе 4. Описать гистологические срезы для оценки состояния структур перепончатого лабиринта улитки в изучаемой и интактной группах 5. Обосновать использование комбинации гентамицин + фуросемид в качестве экспериментального моделирования сенсоневральной тугоухости для дальнейшего исследования по восстановлению сенсорного эпителия методом генной инженерии.
Материалы и методы: Объектом исследования является экспериментальная модель сенсоневральной тугоухости, подходящая для изучения регенерации волосковых клеток стволовыми клетками и методами генной инженерии. Световой микроскоп, формалин, декальцинирующий раствор, спиртовой раствор, ксилол, парафиновые блоки, гематоксилин и эозин (Вещества для фиксации и окраски гистологических срезов).
Описание работы: В данной работе с помощью программы Aperio ImageScope Version 12.4.6.5003 был проведен анализ сканированных образцов гистологических поперечных срезов улитки. Образцы были приготовлены для изучения с использованием световой микроскопии. Образцы были получены от двух групп взрослых самцов мышей (8 недель), в каждой группе по 3 особи: 1 группа- подвергалась воздействию комбинации гентамицина 200 мг/кг (Дальхимфарм, Россия) и фуросемида 400 мг/кг (Обновление ПФК, Россия) однократно внутрибрюшинно, 2 группа - интактная (контроль). Буллы извлекались на 7-ой день после введения комбинации препаратов для дальнейшего приготовления поперечных срезов и их анализа с использованием световой микроскопии.
Результаты работы: 1) Проведен анализ срезов булл испытуемой и интактной групп 2) Дано описание характера изменений структур перепончатого лабиринта в испытуемой группе (сосудистой полоски, волосковых клеток, текториальной мембраны, рейсснеровой мембраны) 3) Дана сравнительная характеристика гистологической картины испытуемой и контрольной группы
Выводы: 1) Изучена современная литература по данной тематике 2) Изучена анатомия и гистология внутреннего уха 3) По результатам гистологических поперечных срезов удалось показать стойкие и грубые изменения структур перепончатого лабиринта. 4) Данная экспериментальная модель вызывает не только повреждение волосковых клеток, но и текториальной мембраны, сосудистой полоски, спиральной связки, снижение плотности нейронов в спиральном ганглии. 5) Данная модель пригодна для оценки отопротективных свойств фармакологически активных соединений от лекарственно-индуцированных нарушений слуха. 6) Для изучения восстановления слуха генно-инженерными методами модель не пригодна, так как вызывает тяжелые многосторонние повреждения структур внутреннего уха. 7) Требуются дальнейшие исследование для выбора оптимальной экспериментальной модели сенсоневральной тугоухости (в том числе коррекция дозы комбинации фуросемида и гентамицина для более мягкого воздействия) с целью изучения восстановления слуха генно-инженерными методами.
Литературные источники
1. Effects of combined gentamicin and furosemide treatment on cochlear ribbon
synapses // ScienceDirect URL:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/...
hub (дата обращения: 10.02.2023).
2. Effects of Combined Gentamicin and Furosemide Treatment on Cochlear
Macrophages // MDPI URL: https://www.mdpi.com/1422-0067/23/13/7343 (дата
обращения: 10.02.2023).
3. Experimental animal models of drug-induced sensorineural hearing loss: a
narrative review // National Library of Medicine URL:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC85065... (дата обращения:
10.02/2023).
4. Mesenchymal stem cells for sensorineural hearing loss: protocol for a systematic
review of preclinical studies // BMC URL:
https://systematicreviewsjournal.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13643-019-
1015-7 (дата обращения: 10.03.2023).
5. Adenovirus-mediated overexpression of a gene prevents hearing loss and
progressive inner hair cell loss after transient cochlear ischemia in gerbils //
PubMed URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12601397/ (дата обращения:
12.02.2023).