![]() |
Даты проведения с 2023-01-01 по 2023-12-01 |
Новый гибридный белок — потенциальный онкоген CLTC-RPS6KB1.
Макеева Алиса Михайловна
Класс: 10.
тел.: (985)288-05-51; e-mail: mackeewaalisa@yandex.ru
Научный руководитель: Айсин Камиль Надирович
Работа выполнена в НИЛ Нуклеопротеидов, кафедры химии природных
соединений, химического факультета МГУ имени М. В. Ломоносова.
Рак является вторым в мире заболеванием по смертности. По данным ВОЗ в 2020 году
онкологические заболевания выявили у 19,3 млн людей, скончались 10 млн, по прогнозу к
2030 году от раковых заболеваний погибнут более 13 млн людей1
. Поэтому исследования,
посвященные поиску новых протоонкогенов и способов лечения неизвестных ранее видов
рака, очень актуальны. Моя работа является частью большого проекта по исследованию
четырёх потенциально драйверных мутаций. Я присоединилась к проекту на стадии
проверки клеток на малигнизациию.
Основная задача моей работы — проверить, вызывает ли химерный ген CLTC-RPS6KB1
превращение клеток в раковые.
Для этого обнаруженную мутацию мы воспроизводили в человеческих клетках, которые
потом проверяли на злокачественную трансформацию.
В этих целях мы вели моноклональные клеточные линии, чтобы использовать их в двух
экспериментах, которые помогли бы оценить превратились ли мутантные клетки в раковые.
Это два теста на оценку скорости пролиферации2
: МТТ-тест и подсчет клеток, окрашенных
красителем hökst, с помощью специального ПО.
Для экспериментов по оценке скорости пролиферации было выбрано несколько клеточных
линий, но на опыты мы отобрали только моноклоны линии MCF10A, поскольку они показали
увеличенную скорость пролиферации. Кроме того, эта клеточная линия обладает рядом
преимуществ: это иммортализованная, но не раковая линия, их часто используют в
аналогичных исследованиях и поэтому она широко представлена в литературе3
.
МТТ-тест проводился четыре раза, для достижения статистической достоверности. На 96-
луночный планшет мы высаживали клетки четырех колоний: по три колонии потенциально
раковых клеток и одна колония клеток дикого типа. Каждая колония высаживалась в 4
повторностях. В течении шести дней мы измеряли концентрацию клеток с помощью
спектрофотометра.
Ещё один эксперимент, который помог нам определить стали ли клетки раковыми это
сравнение скорости пролиферации окрашенных клеток, проведенный трижды. На 48
луночный планшет было высажено в двух повторностях три колонии потенциально раковых
клеток и колония клеток дикого типа. Каждый день мы производили подсчёт клеток,
окрашивая ядра красителем hökst и считали их с помощью специального ПО.