РАЗРАБОТКА ОПЫТНОЙ ТЕХНОЛОГИИ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ ПРИМУЛЫ КОРТУЗОВИДНОЙ PRIMULA CORTUSOIDES L.

1. Разработать методику введения в культуру тканей примулы кортузовидной в зависимости от типа экспланта. 2. Изучить и подобрать оптимальные условия для культивирования микрорастений примулы кортузовидной в условиях in vitro; 3. Разработать методику адаптации микрорастений примулы к условиям ex vitro. 4. Заложить региональный генетический банк примулы кортузовидной Primula cortusoides L. в Удмуртской Республике.

1. При введении в культуру тканей примулыкортузовидной с использованием семян установлено, что увеличение времени экспозиции эксплантов, а также концентрации самих стерилизующих агентов способствует получению максимальной стерильности (90-100 %) растительного материала, но приводит к значительному снижению жизнеспособности первичных эксплантов в 1,5–5,0 раз (табл. 2). При проведении стерилизации семян примулы кортузовидной 50 %-ным раствором Domestos с увеличением времени экспозиции с 1 мин до 5 мин наблюдалась высокая стерильность (90-100 %) эксплантов, на фоне которой с увеличением времени обработки семян в стерилизующем растворе отмечалось снижение выхода жизнеспособных семян в 2 раза (с 50 % до 25 %) (табл. 2). В ходе работ установлено, что оптимальным вариантом для стерилизации семян является использование в течение 4 минут AgNO3 в концентрации 0,08 %. При данной схеме обработки удается получить максимальное количество стерильного (85 %) и жизнеспособного (81,5%) растительного материала, что способствует быстрому развитию эксплантов. Обработка семян примул AgNO3 в течение 2 минут также характеризуется высокими показателями по жизнеспособности эксплантов (86 %), но с высокой инфицированностью материала (более 50 %), тогда как увеличение времени в данном стерилизующем агенте экспозиции до 6 мин оказывает уже негативное влияние на выход стерильных жизнеспособных эксплантов (63,5 %) (табл. 2). 2. Для быстрого введения в культуру in vitro в качестве эксплантов необходимо использовать почки возобновления. Лучший срок введения исследованных примул в культуру тканей – осень. Ступенчатые схемы стерилизации являются наиболее эффективными для увеличения выхода стерильных и жизнеспособных эксплантов. 3. На этапе введения эксплантов в культуру тканей необходимо применять питательные среды, не содержащие витаминов и регуляторов роста, что позволяет на ранних стадиях развития экспланта выявить и удалить инфицированный материал. 4. На этапе микроразмножения введение в состав питательной среды Мурасига и Скуга цитокинина 6-БАП в концентрации 1 мг/л ускоряет развитие пазушных почек. 5. Для укоренения микропобегов примулы оптимальной является среда Мурасига и Скуга, разбавленная вдвое и с пониженным содержанием сахарозы – 15 г/л. Эффективным индуктором ризогенеза является индолил-3-уксусная кислота в концентрации 0,5 мг/л. 6. Для адаптации микрорастений к условиям ex vitro необходимо использовать торфяные таблетки марки Jiffy с последующим их размещением в мини-парниках или теплицах, имеющих механизмы для регуляции проветривания. Лучшей адаптации растений–регенерантов способствует также поддержание высокой влажности и температуры воздуха в пределах 25–27ºС.